实验二 茶叶中多酚类物质的测定
一、原理
酒石酸铁能与多酚类物质反应，生成紫蓝色络合物，络合物吸光度与多酚类含量在线性范围内成正比，符合朗伯比尔定律。因此，可以用分光光度法来测定多酚类含量。 二、仪器设备
l、分光光度计
2、天平、电炉、常用容量、吸量玻璃仪器等。 三、样品、试剂及配制方法
1、样品：不同等级绿茶或不同茶类茶样。
2、酒石酸铁溶液
称取FeSO4·7H2O 1克(AR级)与KNa C4H8·H2O(洒石酸钾钠)5克(AR)，加蒸馏水溶解定容至1000毫升，该溶液可稳定使用一周。
3、pH7.5磷酸缓冲液(PBS)
（1）1/15M的Na2HPO4·12H20溶液：称取23.9克Na2HPO4·12H20，加水溶解后定容至1000ml。
（2）1/15M 的KH2PO4溶液：称取9.08克经110℃烘干2h的KH2PO4 (AR级)加入水溶解后定容至1000ml。
取上述1/15M Na2HPO4溶液85毫升和1/15M 的KH2P04溶液15毫升混合均匀， 即得pH7.5的磷酸缓冲液(该液宜冷藏随配随用)。 四、测定步骤
1、供试液制备
准确称取磨碎干样3克，加沸水450毫升，立即移入沸水浴，浸提45min，每隔10min分钟摇动一次。然后趁热减压过滤，残渣用少量热水洗2—3次，合并滤液；滤液置于500毫升容量瓶中，待冷后蒸馏水定容，充分混匀后备用。
2、定量
吸取上述供试液1毫升，注入25毫升容量瓶中，加水4毫升，加酒石酸铁溶液5ml充分混匀，然后再加pH7.5磷酸缓冲液至刻度，即为比色液；除以蒸馏水代替供试液外其余以相同试剂定容至25ml作为空白对照，然后用540nm波长
1cm比色杯测定吸光度A值。
3、计算
茶多酚％＝
×100
注：“3.913”——用1cm比色杯，当吸收光度等于1.00时，每1ml茶汤中含有茶多酚相当于3.913mg。
五、实验记录 1、 冲泡茶样所用水须蒸馏水或不含铁质水。
2、 比色液在4小时内吸光度较稳定，比色须在该时间内完成，不宜放置
过久。
实验二 茶叶中多酚类物质的测定
一、原理
酒石酸铁能与多酚类物质反应，生成紫蓝色络合物，络合物吸光度与多酚类含量在线性范围内成正比，符合朗伯比尔定律。因此，可以用分光光度法来测定多酚类含量。 二、仪器设备
l、分光光度计
2、天平、电炉、常用容量、吸量玻璃仪器等。 三、样品、试剂及配制方法
1、样品：不同等级绿茶或不同茶类茶样。
2、酒石酸铁溶液
称取FeSO4·7H2O 1克(AR级)与KNa C4H8·H2O(洒石酸钾钠)5克(AR)，加蒸馏水溶解定容至1000毫升，该溶液可稳定使用一周。
3、pH7.5磷酸缓冲液(PBS)
（1）1/15M的Na2HPO4·12H20溶液：称取23.9克Na2HPO4·12H20，加水溶解后定容至1000ml。
（2）1/15M 的KH2PO4溶液：称取9.08克经110℃烘干2h的KH2PO4 (AR级)加入水溶解后定容至1000ml。
取上述1/15M Na2HPO4溶液85毫升和1/15M 的KH2P04溶液15毫升混合均匀， 即得pH7.5的磷酸缓冲液(该液宜冷藏随配随用)。 四、测定步骤
1、供试液制备
准确称取磨碎干样3克，加沸水450毫升，立即移入沸水浴，浸提45min，每隔10min分钟摇动一次。然后趁热减压过滤，残渣用少量热水洗2—3次，合并滤液；滤液置于500毫升容量瓶中，待冷后蒸馏水定容，充分混匀后备用。
2、定量
吸取上述供试液1毫升，注入25毫升容量瓶中，加水4毫升，加酒石酸铁溶液5ml充分混匀，然后再加pH7.5磷酸缓冲液至刻度，即为比色液；除以蒸馏水代替供试液外其余以相同试剂定容至25ml作为空白对照，然后用540nm波长
1cm比色杯测定吸光度A值。
3、计算
茶多酚％＝
×100
注：“3.913”——用1cm比色杯，当吸收光度等于1.00时，每1ml茶汤中含有茶多酚相当于3.913mg。
五、实验记录 1、 冲泡茶样所用水须蒸馏水或不含铁质水。
2、 比色液在4小时内吸光度较稳定，比色须在该时间内完成，不宜放置
过久。