抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较

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中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期（Ｍ砌ｔ，ｙ以ＳｄＭａｙ２００４

Ｖ０１．２４Ｎｏ．３

抗茵肽与抗生素的体外抗菌效果比较

汪以真，王中强，许梓荣

（浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室，浙江杭州３ｌ００２９）

摘要：应用由Ｈａｎｃｏｃｋ实验室改进的微量肉汤稀释法测定了ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｍａｇａｉｎｉｎ２、ｄｅｆｅｎｓｉｎ

１、

ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ、ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ等７种抗茵肽和盐酸金霉素、去甲万古霉素、土霉素、强力霉素等４种抗生素的体外抗茵活性，并且使用薄层琼脂糖孔穴扩散法比较了抗茵肽中ｃｅｃｒｏｐｉｎＰ１和ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ与土霉素和呋喃唑酮对大肠杆茵Ｋ８８的抑茵效果。结果发现，抗茵肽与抗生素一样对几种革兰氏阳性茵和阴性茵都有不同程度的抗茵效果。其

中ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＰ１和ｄｅｆｅｎｓｉｎｌ对大肠杆菌的２个菌株ＡＴＣＣ２５９２２和Ｋ８８的抗茵活性高于抗生素，ｄｅｆｅｎｓｉｎ

ｌ是各种抗茵肽中对金黄色葡萄球茵抗菌效果最好的。抗生素对试验用金黄色葡萄球茵的抑制活性总体上要好于抗

茵肤。与抗生素相比。ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ对猪霍乱沙门氏茵和鼠伤寒沙门氏茵具有更好的抗茵效

果。另外，抗茵肤的抑茵圈边缘十分清晰，而抗生素的整个抑菌圈都比较模糊且界线不明。因此，从抗茵效果方面考虑，抗茵肽可以代替抗生素用于疾病的预防和治疗。关键词：抗茵肽；抗生素；药敏试验

中图分类号：Ｓ８５９．７９

文献标识码：Ａ

文章编号：１００５—４５４５（２００４）０３一０２７０—０４

近些年来，畜产品中的抗生素药物残留问题越来越受到人们的重视，许多国家包括我国已经严格限制将抗生素作为保健和促生长剂添加到畜禽饲料中，有的甚至禁止任何抗生素的使用。同时，由于抗生素的乱用与滥用，也造成了许多细菌产生了耐药菌株，并且其出现的频率已超过抗生素新药的开发速度，给疾病的治疗带来了很大的难度。因此，寻找安全高效的抗生素替代品就显得十分重要。抗菌肽是生物体内存在的一种天然抗菌活性物质，已经从哺乳动物（包括人）及昆虫、两栖动物中发现了几百种抗菌肽，其中有些已经分离提取了出来，并对其结构、抗菌活性等作了许多的研究，发现其抗菌活性高效、广谱，并且本身无毒、无害［１’２］。天然的抗菌肽主要存在于生物体中的中性粒细胞、舌部、气管和小肠表面，其自身携带有大量的正电荷［２’３］。尽管目前人们对其抗菌机理还

收稿日期：２００３—０３—１０

基金项目：国家自然科学基金资助项目（３００４００３６）；浙江省人才培养专项基金资助项目（ＲＣ０１０５３）作者简介：汪以真（１９６５一），男，教授。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｚｗａｎｇ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

没有完全弄清楚，但比较一致的观点认为，它们是通过横跨膜内外的离子通道的形成来达到杀菌作用的，并且这种作用不需要特殊的受体口“］。正是由于这种独特的作用机制，许多人认为其不易产生耐药性，是一种高效安全的预防、治疗疾病的药物［６］。本试验通过体外试验研究，比较了７种抗菌肽和４种临床使用的抗生素对几种革兰氏阳性菌和阴性菌的抑菌效果，旨在为抗菌肽替代抗生索应用于生产提供资料。

１

１．１ｃｒｏｐｉｎ

材料与方法

主要试剂、药品及设备

抗菌肽ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ（猪）、ｃｅ—

ｌ

Ａ（猪）、ｍａｇａｉｎｉｎ２（蛙）、ｄｅｆｅｎｓｉｎＨＮＰ一１（人）、

ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ（牛）、ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ和ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ（牛），购白美国肽公司（ＡｍｅｒｉｃａｎＰｅｐｔｉｄｅＣｏｍｐａｎｙ），其氨基酸序列见表１；４

种抗生素为盐酸金霉素（Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、去甲万古霉素（Ｄｅｍｅｔｈｙｌｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）、土霉素（０ｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）和强力霉素（Ｄ０ｘ”ｙｃｌｉｎｅ），购自中国药品生物制品检定所；琼脂粉（纯化），购自中国医药（集团）上海化学试剂公司；Ｐｅｐ—

ｔｏｎｅ和ｙｅａｓｔｅｘｔｒａｃｔ，购白ｏＸＯＩＤ公司；琼脂糖（ａｇａｒｏｓｅ），购

ＨｉｓｔｉｏｃｙｔｉｃＵＩｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＴｅｓｔｅｓｉｎＣｏｃｋｓＲａｉｓｉｎｇａｔＤｉｆｆｅｒｅｎｔＤｉｅｔａｒｙＣｏｎ—ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＳｅｌｅｎｉｕｍ

ＺＨＡＮＧＪｉａｎ—ｘｉｎ，ＹＵＥ

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Ｈｏｎｇ—ｑｕａｎ，ＨＥＪｕｎ—ｐｉｎｇ

（（■Ｚ彪ｇＰ∥Ａ卯？俄口Ｚ

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７０ｃ’＾咒ＤＺＤｇｙ，Ｓ＾口挖．ｒｉＡｇｒｌ０“Ｚ芒“，‘口ＺＵ咒ｉ口Ｐｒｓｉ￡ｙ，了■ｉｇ“，Ｓ＾日咒．ｒｉ０３０８０１，（Ｍｆ，２口）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｓｅｌｅｎｉｕｍ６

ｇｒｏｕｐｓ

ｔｏ

ａｔ

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ｔｈｅｈｉｓｔｉｏｃｖｔｉｃｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｊｎｃｏｃｋ’ｓｔｅｓｔｅｓ．１８０ｃｏｃｋｓｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ

ｄａｙｏｌｄ．ＴｈｅＣＫ

ｇｒｏｕｐ

ｗａｓｓｕｐｐｌｉｅｄｂａｓｉｃｆｅｅｄｗｈｉｃｈｃｏｎｔａｉｎｓｔｈｅｓｅｌｅｎｉｕｍｏｆＯ．０２６一Ｏ．０３１

ｓｅｌｅｎｉｔｅ

１，５，１Ｏ，ｌ５，２０

ｍｇ／ｋｇ．Ｆｒｏｍ１ｓｔ

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ｇｒｏｕｐ

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ｏｕｔ

ｉｒｒｅｇｕｌａｒ，ｎｕｃｌｅｕｓｍｅｍｂｒａｎｅｐａｒｔｌｙｄｉｓｓｏｌｖｅｄ，ａｎｄｃｈｒｏｍａｔｉｎｆｌｏｗｅｄｅｎＩａｒｇｅｍｅｎｔ，ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｄｉｓａｐｐｅａｒｅｄａｎｄｖａｃｕｏｌｅｓｆｏｒｍｅｄ．Ｂｕｔｔｈｅｔｈｅｓｏｄｉｕｍｓｅｌｅｎｉｔｅ

ｃｏｎｔｅｎｔ

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ｏｆｃｏｃｋ’ｓｒａｔｉｏｎｓｈｏｕｌｄｎｏｔｂｅｍｏｒｅｔｈａｎｌ

ｍｇ／ｋｇ．

１（ｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｃｋ；ｔｅｓｔｅｓｔｉｓｓｕｅ；ｓｏｄｉｕｍｓｅｌｅｎｉｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ

万方数据　

中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期鳓锄Ｊ

ｙ甜Ｓｆｉ

Ｍａｙ２００４

Ｖ０１．２４Ｎｏ．３

２７１

自上海生工；牛血清白蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＢＳＡ）。购购自ＤＩＦＣｏ公司；９６孔平板（平底）和聚丙烯离心管，购自自杭州四季青生物工程材料有限公司；乙酸（３６％），购自中国Ｎｕｎｃｌｏｎ公司；ＭｏｄｅＩ５５０型酶标仪，购自ＢＩｏ—ＲＡＤ公司｝９医药（集团）上海化学试剂公司；Ｍｕｅｌｌｅ卜Ｈｉｎｔｏｎ（ＭＨ）肉汤，

ｃｍ培养ｍ及摇床，实验室自备。

表１抗茵肽的氨基酸序列

抗菌肽

氮

基酸序列

Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ

Ａｒｇ—Ａｒｇ—Ｔｒｐ—Ｇｌｎ—Ｔｒｐ—Ａｒｇ—Ｍｅｔ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—ＧＩｙＢａｃｔｅｎｅｃｉｎ

Ａｒｇ—Ｌｅｕ—Ｃｙｓ—Ａ‘ｇ—ＩＩｅ—Ｖａｌ—Ｖａｌ—Ｉｌｅ—Ａ。ｇ・Ｖａｌ—Ｃｙｓ—Ａｒｇ

Ｍａｇａｉｎｉｎ

２

Ｇｌｙ．Ｉｌｅ—Ｇｉｙ—Ｉ。ｙｓ—Ｐｈｅ—Ｌｅｕ—Ｈｉｓ—Ｓｅｒ．Ａｌａ—Ｌｙ争Ｌｙｓ—Ｐｈｅ—Ｇｌｙ—Ｌｙｓ—Ａｉａ—Ｐｈｅ－Ｖａｌ—ＧＩｙ＿Ｇｌｕ—Ｉｉｅ—Ｍｅ卜Ａｓｎ—ｓｅｒ

ＣｅｃｒｏｐｉｎＰ１Ｓｅ卜Ｔｒｐ—Ｌｅｕ—Ｓｅｒ－Ｌｙｓ—Ｔ１１ｆ—Ａｉａ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—Ｇｌｕ～Ａｓｎ—Ｓｅｒ—Ａｌａ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ａｒｇ．Ｉｌｅ—Ｓｅｒ—Ｇｌｕ—Ｇｌｙ一玎ｅ—Ａｊａ—Ｉｉｅ—Ａｌ丑一Ｉｌｅ—Ｇｌｎ—Ｇｌｙ．Ｇｌｙ－Ｐｍ—ＡｒｇＬｙｓ—Ｔｒｐ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—Ｐｈｅ—Ｌｙｓ—Ｉ．ｙｓ—ｌｌｅ—Ｇｌｕ—Ｌｙｓ—Ｖａｌ—Ｇｌｙ—Ｇｌｎ—Ａｓｎ—Ｉｌｅ—Ａｒｇ—Ａｓｐ—Ｇｌｙ—ｎｅ—ｌｌｅ—Ｌｙｓ—Ａｌａ—Ｇｌｙ—Ｐｒｏ—Ａｌａ—Ｖａｌ－ＡＩａ—Ｖａｌ—Ｖａｌ—Ｇｌｙ—Ｇｌｎ—Ａｌａ—ＣｅｃｒｏｐｉｎＡ

Ｔｈｒ．Ｇｌｎ－Ｉｌｅ．Ａｌａ—Ｌｙｓ—ＮＨ２

Ｉｎｄｏｌｉｃ试ｉｎＩＩｅ—Ｌｅｕ—Ｐｒｏ—Ｔｒｐ—Ｌｙｓ—Ｔｒｐ—Ｐｒｏ—Ｔｒｐ—Ｔｒｐ—Ｐｒｏ—Ｔｒｐ—Ａ‘ｇ—Ａｒｇ—ＮＨ２

１）ｅｆｅＴｌｓｉｎｌ

Ａｌａ—Ｃｙｓ—Ｔｙ卜Ｃｙｓ—Ａｒｇ—ｌｌｅ—Ｐｒｏ—Ａｌａ—Ｃｙｓ—Ｉｌｅ—Ａｌａ—Ｇｌｙ—Ｇｌｕ—Ａ‘ｇ—Ａ‘ｇ—Ｔｙ卜Ｇｌｙ—Ｔｈｒ—Ｃｙｓ—Ｉｌｅ—Ｔｙ卜Ｇｌｎ—Ｇｌｙ—Ａｒｇ—Ｌｅｕ—Ｔｒｐ—Ａｌａ—Ｐｈｅ—Ｃｙｓ—Ｃｙｓ

１．２细菌大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｚｉ）Ｋ８８、大肠杆菌ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉ—

待测抗菌肽，１１孔作为扫描对照孔不加肽，３７Ｃ

９０

ｒ／ｍｉｎ培

ｃａ

ＴｙｐｅＣｕＩｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，美国标准菌库）２５９２２、猪霍乱沙养１８～２４ｈ，这样待测抗菌肽的终质量浓度分另ｑ为６４、３２、１６门氏菌（Ｓ口ｚｍｏｎＰｚ肠ｃ＾ｚ“Ｐ朋ｅ５群如）ＡＴＣＣ５００２０、鼠伤寒沙门

……ｏ．１２５ｍｇ／Ｌ。最小抑菌浓度ＭＩＣ（ｍｉｎｉｍａｌ

ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ

氏菌（５口ｚｍｏ卵￡ｚ肠ｆ抄＾ｉ棚“ｒ玩ｍ）ＡＴｃＣ５００１３和金黄色葡萄ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）就是能阻止５０％以上细菌生长的最小肽浓球菌（Ｓｆ口户炒ｋ（，ｆｆ“５删卯摊ｓ）ＡＴＣＣ

２５９２３，由浙江省卫生防

度［８］。用酶标仪在４９０ｎｍ下对平板进行扫描，肽的ＭＩＣ的确疫中心提供，一２０ｃ暗处保存于２０％甘油冷冻管中备用。

定按照比对照孔（１１孔）的浑浊程度低５０％以上的最小质量１．３药敏试验

浓度计算。从没有细菌生长的平板孔中的内容物中取１０

ｐＬ

１．３．１

微量肉汤稀释法（ｂｒｏｔｈ

ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ）

该

涂布到ＭＨ琼脂平板上，３７℃培养１８ｈ，以此来确定肽的最

方法是由ＮＣＣＬＳ（ＮａｔｉｏｎａＩＣｏｍｍｉｔｔｅｅｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏ—

小杀菌浓度（ＭＢＣ）。ＭＢＣ（ｍｉｎｉｍａｌ

ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ

ｒｙ

Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）推荐的在体外对需氧型细菌进行药敏试验的方ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）就是能抑制任何残余菌落生长的肽的最低浓

法＂］。由于抗菌肽自身结构的特殊性，该方法中有些地方不适度‘“。

用于对其进行抗菌活性的测定，于是Ｈａｎｃｏｃｋ实验室对其做１．３．２

薄层琼脂糖孔穴扩散法在７ｍＬＬＢ＋ａｇａｒｏｓｅ培养

了相应的改进［８］，已有对比试验证明改进后的方法更能准确基中，加入培养至对数生长期的Ｅ．ｆ甜ｉＫ８８（１０７

ＣＦＵ／ｍＬ）１０

反映抗菌肽的抗菌效果［９］。

ｐＬ，摇匀，倒入培养皿，待其冷却凝固后，用打孔器在培养基首先用无菌蒸馏水在聚丙烯离心管中将抗菌肽和抗生素

上等距离打５个孔（直径３ｍｍ），标号１、２、３、４、５。第１组分溶解制成ｌ２８０ｍｇ／Ｌ的储备液，然后用等量无菌的ｏ．０２％乙

别加入同质量浓度的ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ（２００、ｌｏｏ

ｍｇ／Ｌ）和ｃｅｃｒｏｐｉｎ

酸（含Ｏ．４％ＢＳＡ）稀释，再用ｏ．０１％乙酸（含ｏ．２％ＢＳＡ）溶Ｐｌ副ｌ、２孔和３、４孔中，５号孔加５弘ＬＯ．０１％ＨＡＣ作为对

液对等量稀释后的溶液再进行一系列的双倍稀释，得到质量

照。第２组分别加入同浓度的土霉素、呋喃唑酮、ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐｌ

浓度为６４０、３２０、１６０……１．２５ｍｇ／Ｌ的系列稀释液，４Ｃ下保

和ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ，５孔号加５弘Ｌｏ．ｏｌ％ＨＡＣ作为对照。各组均

存备用¨ｊ。

做３个重复，３７Ｃ倒置过夜培养。

将待测细菌在灭菌ＭＨ肉汤琼脂平板上过夜培养，挑取菌落接种于灭菌试管中的ＭＨ肉汤，３７

Ｃ

１８０

ｒ／ｍｉｎ过夜培

２

结果

养。将培养后的菌液稀释至２×１０５～７×１０５ＣＦＵ／ｍＬ，向无菌２．１微量肉汤稀释法

见表２。结果表明，抗菌肽与抗生素

的９６孔平板中的ｌ～１１孔各加入ｌｏｏｐＬ的菌液，１２孔不加

一样对几种革兰氏阳性菌和阴性菌都有较好的抗菌效果。与

菌液而加ｌｏｏ弘ＬＭＨ肉汤。然后从ｌ～ｌｏ孔逐一加入相应的

表２抗生素与抗茵肽的体外抗茵试验结果

ｍｇ／Ｌ

注：ＮＤ表示在６４ｍｇ／Ｉ，的药物质量浓度范围内没有明显抑菌或杀菌效果

万　

方数据

２７２

中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期ｃ协锄ｔ，ｙ“Ｓ“Ｍａｙ

２００４Ｖ０１．２４

Ｎｏ．３

抗生素相比，抗菌肽对大肠杆菌的２个不同菌株的抗菌活性更高，其中ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ、ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１及ｄｅｆｅｎｓｉｎ１的活性最高，

尤其ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ和ｄｅｆｅｎｓｉｎ１的ＭＩＣ值只有ｏ．２５ｍｇ／Ｌ，远

低于４种抗生素的ＭＩＣ。这一方面说明２类抗菌剂对体内主要的有害菌都有很好的作用效果，另一方面说明总体上抗菌肽的敏感性高于抗生素，杀菌效果更好。另外，ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ、ｃｅ—

ｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ对猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌

的抗菌效果也要好于抗生素，并且它们对前者的活性要更高。土霉素、盐酸金霉素和强力霉素是动物生产上比较常用的几

种抗生素，从表２可以看出，这３种抗生素对几种试验菌株都

有较好的抗菌活性，对金黄色葡萄球菌的抗菌效果要好于抗菌肽。去甲万古霉素对各试验菌株的活性都比较低，是所有试验抗菌剂中效果最差的。各试验菌株对抗菌肽中的ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ和Ｐｌ都比较敏感。Ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ在几种抗菌肽中对金黄色葡

萄球菌的效果最好＇ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ的活性相对较低。

２．２

薄层琼脂糖孔穴扩散法几种抗菌剂的杀菌效果见图ｌ、２。抗菌肽的抑菌圈边缘十分清晰，整个抑菌圈呈现明亮状

态，表示所到之处细菌的生长被完全抑制，而抗生素的抑菌圈

比较模糊，界线也不是很分明。这说明抗菌肽的抑菌效果比抗生素更彻底。通过对抑菌圈大小的比较也进一步验证了大肠杆菌对抗菌肽更敏感，更容易被其所抑制。

图２几种抗菌剂的琼脂糖扩散试验

１．土霉素；２．呋哺唑酮；

３．ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１；４．ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ；５．ＨＡＣ对照

３

讨论

１９４９年Ｃ）ｒａｎａｍｉｄ公司科研人员发现金霉素有促生长的

作用，由此开创了抗生素作为饲料添加剂使用的先河。此后的

研究还发现，抗生素具有提高饲料利用率，提高产蛋率、孵化率及预防疾病的效果，使得大量的抗生素应用于动物生

产ｍ］。从本试验也不难看出，以金霉素、土霉素和强力霉素为

万　

方数据代表的常用作饲料添加剂的抗生素确有比较好的抗菌效果，尤其在对金黄色葡萄球菌要好于抗菌肽，但是对大肠杆菌的效果则要差得多。分析其原因，可能是作为革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌与革兰氏阴性菌在细胞膜的结构上存在很大差异。革兰氏阴性菌的细胞膜外侧面含有大量的带有负电荷的脂多糖（ＬＰＳ），而抗菌肽本身是一种阳离子肽，携带大量的正电荷，因此很容易与其结合，形成离子通道，穿透细胞膜致死细菌。革兰氏阳性菌的细胞膜主要成分是肽聚糖（ｐｅｐｔｉｄｏｇｌｙ—ｃａｎ，或称粘肽ｍｕｃｏｐｅｐｔｉｄｅ），由于其含有一些磷壁酸和氨基酸羧基而带有一定量的负电荷，这可能是导致其对抗菌肽的

敏感性低于阴性菌的重要原因。不过这方面的研究报道也不

尽一致，也有报道称某些抗菌肽对金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果［２。“。这可能是由于选择的葡萄球菌的菌株不同，或

者使用了不同来源的抗菌肽的缘故。正如试验中的Ｉｎｄｏｌｉ—ｃｉｄｉｎ，对葡萄球菌的抑制效果就比较明显。

试验用的抗菌肽相互之间在活性上也存在较大差异，有些效果好于抗生素，有些不如抗生素。这是由抗菌肽自身的结构及其来源所决定的，正如抗生素相互之间的抗菌效果也有差别一样，我们正是要通过试验选择理想的抗菌肽作为抗生素的替代品。另外，抗菌肽还有抗真菌［２““２“…、病毒［１４“５３和原生动物［２］等作用。薄层琼脂糖孔穴扩散试验还进一步证明了抗菌肽的抑菌效果更彻底。这些都是抗生素所不及的。本试验中一些抗菌剂对细菌没有表现出明显的抑制效果，并不是说它没有抗菌活性，只是试验浓度范围内没有观察到，如果加大浓度，很可能会有抗菌效果出现。已有试验测得ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎｃｉｎ

（牛）对金黄色葡萄球菌ＨＧ３８６的ＭＩＣ是７５ｍｇ／Ｌ，这也为

我们针对不同的细菌选择不同的抗菌剂提供了依据。同时，如果以后抗菌肽作为抗生素的替代品添加到饲料中，这也可以指导最终的添加量。此外，抗菌肽之间的协同、拮抗作用的研究还不是很多，只有少量报道称一些抗菌肽之间存在协同作用［１］，未见有拮抗作用的报道。相信随着对抗菌肽研究的进一步深入以及现代生物技术的发展，抗菌肽将会为抗菌治疗及

新药的开发带来广阔的前景。参考文献：［１］

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ｔｉｄｅｓ，２０００，２１：１１５５—１

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ｔｅｓｔ

Ｈ７Ｎ３亚型禽流感病毒感染人

２００４年３月，加拿大ＣＦＩＡ（Ｃａｎａｄｉａｎ

Ｆ００ｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎ

Ａｇｅｎｃｙ）的１名工作人员在视察ＦｒａｓｅｒＶａｌｌｅｙ地区暴发Ｈ７Ｎ３亚型

禽流感的养鸡场后，出现了结膜炎和喉痛、咳嗽等上呼吸道症状。经实验室确认，该工作人员感染了Ｈ７Ｎ３亚型禽感染病毒。２００４年４月２日，该地区确诊了第２名感染Ｈ７Ｎ３禽流感病毒的工作人员。目前这２名工作人员均已经完全恢复健康。对于Ｈ７亚型禽流感病毒，此前曾有Ｈ７Ｎ７感染人的报道，而且都恢复了健康。这Ｈ７Ｎ３感染人的事件发生后，该地区对与病禽接触的工作人员采取了加强个人防护、口服Ｔａｍｉｆｌｕ和免疫流感疫苗等一系列措施。其他ｌｏ余名出现流感症状的人正在接受调查，以确认是否感染了同型禽流感病毒。

．

郭志儒摘自：ｗｗｗ．ｃａｎａｄａ．ｃｏｍ

万方数据　

抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

汪以真， 王中强， 许梓荣

浙江大学,饲料科学研究所,教育部动物分子营养重点实验室,浙江,杭州,310029中国兽医学报

CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE2004,24(3)18次

参考文献(15条)

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本文读者也读过(2条)

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本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_zgsyxb200403022.aspx

２７０

中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期（Ｍ砌ｔ，ｙ以ＳｄＭａｙ２００４

Ｖ０１．２４Ｎｏ．３

抗茵肽与抗生素的体外抗菌效果比较

汪以真，王中强，许梓荣

（浙江大学饲料科学研究所教育部动物分子营养重点实验室，浙江杭州３ｌ００２９）

摘要：应用由Ｈａｎｃｏｃｋ实验室改进的微量肉汤稀释法测定了ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｍａｇａｉｎｉｎ２、ｄｅｆｅｎｓｉｎ

１、

ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ、ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ等７种抗茵肽和盐酸金霉素、去甲万古霉素、土霉素、强力霉素等４种抗生素的体外抗茵活性，并且使用薄层琼脂糖孔穴扩散法比较了抗茵肽中ｃｅｃｒｏｐｉｎＰ１和ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ与土霉素和呋喃唑酮对大肠杆茵Ｋ８８的抑茵效果。结果发现，抗茵肽与抗生素一样对几种革兰氏阳性茵和阴性茵都有不同程度的抗茵效果。其

中ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＰ１和ｄｅｆｅｎｓｉｎｌ对大肠杆菌的２个菌株ＡＴＣＣ２５９２２和Ｋ８８的抗茵活性高于抗生素，ｄｅｆｅｎｓｉｎ

ｌ是各种抗茵肽中对金黄色葡萄球茵抗菌效果最好的。抗生素对试验用金黄色葡萄球茵的抑制活性总体上要好于抗

茵肤。与抗生素相比。ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ、ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ对猪霍乱沙门氏茵和鼠伤寒沙门氏茵具有更好的抗茵效

果。另外，抗茵肤的抑茵圈边缘十分清晰，而抗生素的整个抑菌圈都比较模糊且界线不明。因此，从抗茵效果方面考虑，抗茵肽可以代替抗生素用于疾病的预防和治疗。关键词：抗茵肽；抗生素；药敏试验

中图分类号：Ｓ８５９．７９

文献标识码：Ａ

文章编号：１００５—４５４５（２００４）０３一０２７０—０４

近些年来，畜产品中的抗生素药物残留问题越来越受到人们的重视，许多国家包括我国已经严格限制将抗生素作为保健和促生长剂添加到畜禽饲料中，有的甚至禁止任何抗生素的使用。同时，由于抗生素的乱用与滥用，也造成了许多细菌产生了耐药菌株，并且其出现的频率已超过抗生素新药的开发速度，给疾病的治疗带来了很大的难度。因此，寻找安全高效的抗生素替代品就显得十分重要。抗菌肽是生物体内存在的一种天然抗菌活性物质，已经从哺乳动物（包括人）及昆虫、两栖动物中发现了几百种抗菌肽，其中有些已经分离提取了出来，并对其结构、抗菌活性等作了许多的研究，发现其抗菌活性高效、广谱，并且本身无毒、无害［１’２］。天然的抗菌肽主要存在于生物体中的中性粒细胞、舌部、气管和小肠表面，其自身携带有大量的正电荷［２’３］。尽管目前人们对其抗菌机理还

收稿日期：２００３—０３—１０

基金项目：国家自然科学基金资助项目（３００４００３６）；浙江省人才培养专项基金资助项目（ＲＣ０１０５３）作者简介：汪以真（１９６５一），男，教授。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｚｗａｎｇ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ

没有完全弄清楚，但比较一致的观点认为，它们是通过横跨膜内外的离子通道的形成来达到杀菌作用的，并且这种作用不需要特殊的受体口“］。正是由于这种独特的作用机制，许多人认为其不易产生耐药性，是一种高效安全的预防、治疗疾病的药物［６］。本试验通过体外试验研究，比较了７种抗菌肽和４种临床使用的抗生素对几种革兰氏阳性菌和阴性菌的抑菌效果，旨在为抗菌肽替代抗生索应用于生产提供资料。

１

１．１ｃｒｏｐｉｎ

材料与方法

主要试剂、药品及设备

抗菌肽ｃｅｃｒｏｐｉｎＰｌ（猪）、ｃｅ—

ｌ

Ａ（猪）、ｍａｇａｉｎｉｎ２（蛙）、ｄｅｆｅｎｓｉｎＨＮＰ一１（人）、

ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ（牛）、ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ和ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ（牛），购白美国肽公司（ＡｍｅｒｉｃａｎＰｅｐｔｉｄｅＣｏｍｐａｎｙ），其氨基酸序列见表１；４

种抗生素为盐酸金霉素（Ｃｈｌｏｒｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、去甲万古霉素（Ｄｅｍｅｔｈｙｌｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ）、土霉素（０ｘｙｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）和强力霉素（Ｄ０ｘ”ｙｃｌｉｎｅ），购自中国药品生物制品检定所；琼脂粉（纯化），购自中国医药（集团）上海化学试剂公司；Ｐｅｐ—

ｔｏｎｅ和ｙｅａｓｔｅｘｔｒａｃｔ，购白ｏＸＯＩＤ公司；琼脂糖（ａｇａｒｏｓｅ），购

ＨｉｓｔｉｏｃｙｔｉｃＵＩｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆＴｅｓｔｅｓｉｎＣｏｃｋｓＲａｉｓｉｎｇａｔＤｉｆｆｅｒｅｎｔＤｉｅｔａｒｙＣｏｎ—ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆＳｅｌｅｎｉｕｍ

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ｃｏｎ—

ｗｅｅｋ—ｏｌｄａｎｄｔｈｅｈｉｓｔｉｏｃｖｔｉｃｕＩｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｔｈｅｔｅｓｔｉｓｔｉｓｓｕｅｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ

ｔｅｎｔ

ｔｈｅｓｏｄｉｕｍｓｅｌｅｎｉｔｅ

ｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｄａｍａｇｅｓｉｎ

ｔｅｓｔｅｓ

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ｃｏｎｔｅｎｔ

ｏｆｃｅｌｌ

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Ｉ

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ｏｆｃｏｃｋ’ｓｒａｔｉｏｎｓｈｏｕｌｄｎｏｔｂｅｍｏｒｅｔｈａｎｌ

ｍｇ／ｋｇ．

１（ｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｏｃｋ；ｔｅｓｔｅｓｔｉｓｓｕｅ；ｓｏｄｉｕｍｓｅｌｅｎｉｔｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ；ｍｉｃｒｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ

万方数据　

中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期鳓锄Ｊ

ｙ甜Ｓｆｉ

Ｍａｙ２００４

Ｖ０１．２４Ｎｏ．３

２７１

自上海生工；牛血清白蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＢＳＡ）。购购自ＤＩＦＣｏ公司；９６孔平板（平底）和聚丙烯离心管，购自自杭州四季青生物工程材料有限公司；乙酸（３６％），购自中国Ｎｕｎｃｌｏｎ公司；ＭｏｄｅＩ５５０型酶标仪，购自ＢＩｏ—ＲＡＤ公司｝９医药（集团）上海化学试剂公司；Ｍｕｅｌｌｅ卜Ｈｉｎｔｏｎ（ＭＨ）肉汤，

ｃｍ培养ｍ及摇床，实验室自备。

表１抗茵肽的氨基酸序列

抗菌肽

氮

基酸序列

Ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ

Ａｒｇ—Ａｒｇ—Ｔｒｐ—Ｇｌｎ—Ｔｒｐ—Ａｒｇ—Ｍｅｔ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—ＧＩｙＢａｃｔｅｎｅｃｉｎ

Ａｒｇ—Ｌｅｕ—Ｃｙｓ—Ａ‘ｇ—ＩＩｅ—Ｖａｌ—Ｖａｌ—Ｉｌｅ—Ａ。ｇ・Ｖａｌ—Ｃｙｓ—Ａｒｇ

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２

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ＣｅｃｒｏｐｉｎＰ１Ｓｅ卜Ｔｒｐ—Ｌｅｕ—Ｓｅｒ－Ｌｙｓ—Ｔ１１ｆ—Ａｉａ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—Ｇｌｕ～Ａｓｎ—Ｓｅｒ—Ａｌａ—Ｌｙｓ—Ｌｙｓ—Ａｒｇ．Ｉｌｅ—Ｓｅｒ—Ｇｌｕ—Ｇｌｙ一玎ｅ—Ａｊａ—Ｉｉｅ—Ａｌ丑一Ｉｌｅ—Ｇｌｎ—Ｇｌｙ．Ｇｌｙ－Ｐｍ—ＡｒｇＬｙｓ—Ｔｒｐ—Ｌｙｓ—Ｌｅｕ—Ｐｈｅ—Ｌｙｓ—Ｉ．ｙｓ—ｌｌｅ—Ｇｌｕ—Ｌｙｓ—Ｖａｌ—Ｇｌｙ—Ｇｌｎ—Ａｓｎ—Ｉｌｅ—Ａｒｇ—Ａｓｐ—Ｇｌｙ—ｎｅ—ｌｌｅ—Ｌｙｓ—Ａｌａ—Ｇｌｙ—Ｐｒｏ—Ａｌａ—Ｖａｌ－ＡＩａ—Ｖａｌ—Ｖａｌ—Ｇｌｙ—Ｇｌｎ—Ａｌａ—ＣｅｃｒｏｐｉｎＡ

Ｔｈｒ．Ｇｌｎ－Ｉｌｅ．Ａｌａ—Ｌｙｓ—ＮＨ２

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１．２细菌大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｚｉ）Ｋ８８、大肠杆菌ＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉ—

待测抗菌肽，１１孔作为扫描对照孔不加肽，３７Ｃ

９０

ｒ／ｍｉｎ培

ｃａ

ＴｙｐｅＣｕＩｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，美国标准菌库）２５９２２、猪霍乱沙养１８～２４ｈ，这样待测抗菌肽的终质量浓度分另ｑ为６４、３２、１６门氏菌（Ｓ口ｚｍｏｎＰｚ肠ｃ＾ｚ“Ｐ朋ｅ５群如）ＡＴＣＣ５００２０、鼠伤寒沙门

……ｏ．１２５ｍｇ／Ｌ。最小抑菌浓度ＭＩＣ（ｍｉｎｉｍａｌ

ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ

氏菌（５口ｚｍｏ卵￡ｚ肠ｆ抄＾ｉ棚“ｒ玩ｍ）ＡＴｃＣ５００１３和金黄色葡萄ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）就是能阻止５０％以上细菌生长的最小肽浓球菌（Ｓｆ口户炒ｋ（，ｆｆ“５删卯摊ｓ）ＡＴＣＣ

２５９２３，由浙江省卫生防

度［８］。用酶标仪在４９０ｎｍ下对平板进行扫描，肽的ＭＩＣ的确疫中心提供，一２０ｃ暗处保存于２０％甘油冷冻管中备用。

定按照比对照孔（１１孔）的浑浊程度低５０％以上的最小质量１．３药敏试验

浓度计算。从没有细菌生长的平板孔中的内容物中取１０

ｐＬ

１．３．１

微量肉汤稀释法（ｂｒｏｔｈ

ｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ）

该

涂布到ＭＨ琼脂平板上，３７℃培养１８ｈ，以此来确定肽的最

方法是由ＮＣＣＬＳ（ＮａｔｉｏｎａＩＣｏｍｍｉｔｔｅｅｆｏｒＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏ—

小杀菌浓度（ＭＢＣ）。ＭＢＣ（ｍｉｎｉｍａｌ

ｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌ

ｒｙ

Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）推荐的在体外对需氧型细菌进行药敏试验的方ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）就是能抑制任何残余菌落生长的肽的最低浓

法＂］。由于抗菌肽自身结构的特殊性，该方法中有些地方不适度‘“。

用于对其进行抗菌活性的测定，于是Ｈａｎｃｏｃｋ实验室对其做１．３．２

薄层琼脂糖孔穴扩散法在７ｍＬＬＢ＋ａｇａｒｏｓｅ培养

了相应的改进［８］，已有对比试验证明改进后的方法更能准确基中，加入培养至对数生长期的Ｅ．ｆ甜ｉＫ８８（１０７

ＣＦＵ／ｍＬ）１０

反映抗菌肽的抗菌效果［９］。

ｐＬ，摇匀，倒入培养皿，待其冷却凝固后，用打孔器在培养基首先用无菌蒸馏水在聚丙烯离心管中将抗菌肽和抗生素

上等距离打５个孔（直径３ｍｍ），标号１、２、３、４、５。第１组分溶解制成ｌ２８０ｍｇ／Ｌ的储备液，然后用等量无菌的ｏ．０２％乙

别加入同质量浓度的ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ（２００、ｌｏｏ

ｍｇ／Ｌ）和ｃｅｃｒｏｐｉｎ

酸（含Ｏ．４％ＢＳＡ）稀释，再用ｏ．０１％乙酸（含ｏ．２％ＢＳＡ）溶Ｐｌ副ｌ、２孔和３、４孔中，５号孔加５弘ＬＯ．０１％ＨＡＣ作为对

液对等量稀释后的溶液再进行一系列的双倍稀释，得到质量

照。第２组分别加入同浓度的土霉素、呋喃唑酮、ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐｌ

浓度为６４０、３２０、１６０……１．２５ｍｇ／Ｌ的系列稀释液，４Ｃ下保

和ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ，５孔号加５弘Ｌｏ．ｏｌ％ＨＡＣ作为对照。各组均

存备用¨ｊ。

做３个重复，３７Ｃ倒置过夜培养。

将待测细菌在灭菌ＭＨ肉汤琼脂平板上过夜培养，挑取菌落接种于灭菌试管中的ＭＨ肉汤，３７

Ｃ

１８０

ｒ／ｍｉｎ过夜培

２

结果

养。将培养后的菌液稀释至２×１０５～７×１０５ＣＦＵ／ｍＬ，向无菌２．１微量肉汤稀释法

见表２。结果表明，抗菌肽与抗生素

的９６孔平板中的ｌ～１１孔各加入ｌｏｏｐＬ的菌液，１２孔不加

一样对几种革兰氏阳性菌和阴性菌都有较好的抗菌效果。与

菌液而加ｌｏｏ弘ＬＭＨ肉汤。然后从ｌ～ｌｏ孔逐一加入相应的

表２抗生素与抗茵肽的体外抗茵试验结果

ｍｇ／Ｌ

注：ＮＤ表示在６４ｍｇ／Ｉ，的药物质量浓度范围内没有明显抑菌或杀菌效果

万　

方数据

２７２

中国兽医学报２００４年５月第２４卷第３期ｃ协锄ｔ，ｙ“Ｓ“Ｍａｙ

２００４Ｖ０１．２４

Ｎｏ．３

抗生素相比，抗菌肽对大肠杆菌的２个不同菌株的抗菌活性更高，其中ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ、ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１及ｄｅｆｅｎｓｉｎ１的活性最高，

尤其ｃｅｃｒｏｐｉｎＡ和ｄｅｆｅｎｓｉｎ１的ＭＩＣ值只有ｏ．２５ｍｇ／Ｌ，远

低于４种抗生素的ＭＩＣ。这一方面说明２类抗菌剂对体内主要的有害菌都有很好的作用效果，另一方面说明总体上抗菌肽的敏感性高于抗生素，杀菌效果更好。另外，ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ、ｃｅ—

ｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１和ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ对猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌

的抗菌效果也要好于抗生素，并且它们对前者的活性要更高。土霉素、盐酸金霉素和强力霉素是动物生产上比较常用的几

种抗生素，从表２可以看出，这３种抗生素对几种试验菌株都

有较好的抗菌活性，对金黄色葡萄球菌的抗菌效果要好于抗菌肽。去甲万古霉素对各试验菌株的活性都比较低，是所有试验抗菌剂中效果最差的。各试验菌株对抗菌肽中的ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ和Ｐｌ都比较敏感。Ｉｎｄｏｌｉｃｉｄｉｎ在几种抗菌肽中对金黄色葡

萄球菌的效果最好＇ｂａｃｔｅｎｅｃｉｎ的活性相对较低。

２．２

薄层琼脂糖孔穴扩散法几种抗菌剂的杀菌效果见图ｌ、２。抗菌肽的抑菌圈边缘十分清晰，整个抑菌圈呈现明亮状

态，表示所到之处细菌的生长被完全抑制，而抗生素的抑菌圈

比较模糊，界线也不是很分明。这说明抗菌肽的抑菌效果比抗生素更彻底。通过对抑菌圈大小的比较也进一步验证了大肠杆菌对抗菌肽更敏感，更容易被其所抑制。

图２几种抗菌剂的琼脂糖扩散试验

１．土霉素；２．呋哺唑酮；

３．ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ｐ１；４．ｃｅｃｒｏｐｉｎ

Ａ；５．ＨＡＣ对照

３

讨论

１９４９年Ｃ）ｒａｎａｍｉｄ公司科研人员发现金霉素有促生长的

作用，由此开创了抗生素作为饲料添加剂使用的先河。此后的

研究还发现，抗生素具有提高饲料利用率，提高产蛋率、孵化率及预防疾病的效果，使得大量的抗生素应用于动物生

产ｍ］。从本试验也不难看出，以金霉素、土霉素和强力霉素为

万　

方数据代表的常用作饲料添加剂的抗生素确有比较好的抗菌效果，尤其在对金黄色葡萄球菌要好于抗菌肽，但是对大肠杆菌的效果则要差得多。分析其原因，可能是作为革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌与革兰氏阴性菌在细胞膜的结构上存在很大差异。革兰氏阴性菌的细胞膜外侧面含有大量的带有负电荷的脂多糖（ＬＰＳ），而抗菌肽本身是一种阳离子肽，携带大量的正电荷，因此很容易与其结合，形成离子通道，穿透细胞膜致死细菌。革兰氏阳性菌的细胞膜主要成分是肽聚糖（ｐｅｐｔｉｄｏｇｌｙ—ｃａｎ，或称粘肽ｍｕｃｏｐｅｐｔｉｄｅ），由于其含有一些磷壁酸和氨基酸羧基而带有一定量的负电荷，这可能是导致其对抗菌肽的

敏感性低于阴性菌的重要原因。不过这方面的研究报道也不

尽一致，也有报道称某些抗菌肽对金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果［２。“。这可能是由于选择的葡萄球菌的菌株不同，或

者使用了不同来源的抗菌肽的缘故。正如试验中的Ｉｎｄｏｌｉ—ｃｉｄｉｎ，对葡萄球菌的抑制效果就比较明显。

试验用的抗菌肽相互之间在活性上也存在较大差异，有些效果好于抗生素，有些不如抗生素。这是由抗菌肽自身的结构及其来源所决定的，正如抗生素相互之间的抗菌效果也有差别一样，我们正是要通过试验选择理想的抗菌肽作为抗生素的替代品。另外，抗菌肽还有抗真菌［２““２“…、病毒［１４“５３和原生动物［２］等作用。薄层琼脂糖孔穴扩散试验还进一步证明了抗菌肽的抑菌效果更彻底。这些都是抗生素所不及的。本试验中一些抗菌剂对细菌没有表现出明显的抑制效果，并不是说它没有抗菌活性，只是试验浓度范围内没有观察到，如果加大浓度，很可能会有抗菌效果出现。已有试验测得ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｎｃｉｎ

（牛）对金黄色葡萄球菌ＨＧ３８６的ＭＩＣ是７５ｍｇ／Ｌ，这也为

我们针对不同的细菌选择不同的抗菌剂提供了依据。同时，如果以后抗菌肽作为抗生素的替代品添加到饲料中，这也可以指导最终的添加量。此外，抗菌肽之间的协同、拮抗作用的研究还不是很多，只有少量报道称一些抗菌肽之间存在协同作用［１］，未见有拮抗作用的报道。相信随着对抗菌肽研究的进一步深入以及现代生物技术的发展，抗菌肽将会为抗菌治疗及

新药的开发带来广阔的前景。参考文献：［１］

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ｔｅｓｔ

Ｈ７Ｎ３亚型禽流感病毒感染人

２００４年３月，加拿大ＣＦＩＡ（Ｃａｎａｄｉａｎ

Ｆ００ｄＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎ

Ａｇｅｎｃｙ）的１名工作人员在视察ＦｒａｓｅｒＶａｌｌｅｙ地区暴发Ｈ７Ｎ３亚型

禽流感的养鸡场后，出现了结膜炎和喉痛、咳嗽等上呼吸道症状。经实验室确认，该工作人员感染了Ｈ７Ｎ３亚型禽感染病毒。２００４年４月２日，该地区确诊了第２名感染Ｈ７Ｎ３禽流感病毒的工作人员。目前这２名工作人员均已经完全恢复健康。对于Ｈ７亚型禽流感病毒，此前曾有Ｈ７Ｎ７感染人的报道，而且都恢复了健康。这Ｈ７Ｎ３感染人的事件发生后，该地区对与病禽接触的工作人员采取了加强个人防护、口服Ｔａｍｉｆｌｕ和免疫流感疫苗等一系列措施。其他ｌｏ余名出现流感症状的人正在接受调查，以确认是否感染了同型禽流感病毒。

．

郭志儒摘自：ｗｗｗ．ｃａｎａｄａ．ｃｏｍ

万方数据　

抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较

作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

汪以真， 王中强， 许梓荣

浙江大学,饲料科学研究所,教育部动物分子营养重点实验室,浙江,杭州,310029中国兽医学报

CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE2004,24(3)18次

参考文献(15条)

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本文读者也读过(2条)

1. 杨博.王永华 抗菌肽研究进展[期刊论文]-生命科学2002,14(3)

2. 徐灵龙.王云峰.石星明.童光志.XU Ling-long.WANG Yun-feng.SHI Xing-ming.TONG Guang-zhi 抗菌肽及其功能研究[期刊论文]-中国生物工程杂志2007,27(1)

引证文献(18条)

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2.缪小群.陈晓生.赵宇飞.陈志华.张福英.温刘发 抗菌肽在肉鸭生产中应用剂量的研究[期刊论文]-中国家禽2006(11)

3.陈晓生.张辉华.周庆国.朱锦兰 抗菌肽对肉鸭雏鸭期肠道主要微生物菌落的影响[期刊论文]-兽药与饲料添加剂2006(4)

4.戴成吉.卞荣星.王晶 抗菌肽的研究进展及在饲料添加剂方面的应用[期刊论文]-畜牧兽医杂志 2008(6)5.陈轶群.曹云鹤 抗菌肽研究进展[期刊论文]-中国畜牧杂志 2009(11)

6.范志勇.周定刚.吴明夏.邓近平.杨坤明.袁绪鹏 猪小肠抗菌肽的抑菌作用研究[期刊论文]-家畜生态学报2006(6)

7.肖勇梅.温浙盛.刘汝青.魏青.任铁玲 体外抑菌试验评价核糖体表达筛选的抗菌肽活性[期刊论文]-中华生物医学工程杂志 2007(5)

8.谢海伟.王娣.杨贤松.孙兰萍.张斌.许晖 合成抗菌肽Tachyplesin Ⅰ的体外生物活性及其降解规律[期刊论文]-中国生物制品学杂志 2011(3)

9.朱勇.徐建雄 抗菌肽饲料添加剂的研究进展[期刊论文]-饲料工业 2006(3)

10.杨玉荣.佘锐萍.彭开松 鸡肠道抗菌肽Gal-13的乙酸提取及其工艺优化[期刊论文]-西北农林科技大学学报（自然科学版） 2008(9)

11.陈俊杰.陈萍 抗菌肽在推进绿色养殖体系建设过程中的优势[期刊论文]-安徽农业科学 2007(17)

12.都海明.戚广州.王建军.张旭晖.陆兆新.王恬 抗菌脂肽对肉鸡生产性能和免疫机能的影响[期刊论文]-江苏农业学报 2010(5)

13.范阔海.于秀萄.李彦东 抗菌肽的研究及畜牧业中的应用[期刊论文]-国外畜牧学-猪与禽 2009(3)

14.都海明.戚广州.王建军.张旭晖.陆兆新.王恬 抗菌脂肽对断奶仔猪生长性能、肠道微生物及血液指标的影响研究[期刊论文]-中国粮油学报 2011(5)

15.虞凤慧.张丽芳.李俊峰.李晓帆.付欣.尚德静 中国林蛙皮肤抗菌肽基因的cDNA克隆及抗菌、抗癌和溶血活性的测定[期刊论文]-生物工程学报 2009(1)

16.郑加兰 抗菌肽的研究与应用[期刊论文]-江西饲料 2010(1)

17.董世雷.刘伟.谢秀芝.YU Hong-wei.王欣 抗菌肽及其应用前景概述[期刊论文]-浙江农业学报 2011(6)18.吴静.李玉峰.林树乾.马秀丽.宋敏训 抗菌肽及其临床应用研究进展[期刊论文]-生物技术通报 2011(3)

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